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Aug 04, 2023

Lavagens de aspiração de colonoscopia para perfil metataxonômico da mucosa de espondilartrite

Scientific Reports volume 13, Número do artigo: 7015 (2023) Citar este artigo

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O estudo da microbiota do trato gastrointestinal de pacientes com espondilartrite (EpA) tem se concentrado na análise de amostras de fezes, que retratam principalmente a microbiota luminal. O objetivo deste estudo foi determinar a contribuição do microbioma mucoso e luminal para a disbiose intestinal em SpA, usando lavagens aspirativas de colonoscopia (CAL), uma alternativa recente para estudos regionais do trato GI. Analisamos 59 CAL (do cólon sigmóide e íleo distal) e 41 amostras de fezes, de 32 pacientes com SpA e 7 indivíduos saudáveis, usando perfis metataxonômicos direcionados ao gene 16S rRNA. Encontrou-se alta prevalência de manifestações do trato GI entre os pacientes com EpA (65,3%). Perfil metataxonômico, amostras confirmadas de CAL do trato GI inferior (cólon ou íleo) apresentaram um bacterioma distinto e indiferenciado e separado daquele encontrado em amostras de fezes ou no início do trato GI (cavidade oral (CO)). Amostras do trato GI inferior e fezes de pacientes com SpA exibiram comportamento semelhante à microbiota do grupo DII com riqueza e diversidade microbiana reduzida, em comparação com os controles saudáveis. Curiosamente, foi encontrado aumento de táxons pró-inflamatórios em pacientes com SpA, como a família Enterobacteriaceae (principalmente no íleo), Succinivibrio spp. e Prevotella stercorea. Por outro lado, os pacientes com SpA apresentaram diminuição significativa nos produtores de SCFA Coprococcus catus e Eubacterium biforme. Nossos dados suportam o valor das amostras de CAL para o estudo regional do trato GI e contribuem com informações de potenciais "taxas disruptivas" envolvidas nos distúrbios associados ao trato GI observados em pacientes com SpA.

As alterações do microbioma (disbiose) no trato gastrointestinal (GI) têm sido associadas a diferentes patologias com graves consequências para a saúde e bem-estar. Em alguns casos, essas alterações do microbioma podem ser geradas como consequência de doenças sistêmicas e degenerativas como a SpA, um grupo de distúrbios reumáticos fortemente relacionado com as manifestações extraintestinais e sintomas gastrointestinais1, sendo indiscutível como a incidência de SpA está aumentando em pacientes com distúrbios intestinais subclínicos inflamação2. Mesmo pacientes SpA soronegativos com sintomas gastrointestinais inespecíficos têm apresentado inflamações intestinais subclínicas definidas por achados ileocolonoscópicos3.

Também foi relatada uma relação de causalidade —associada à predisposição genética—em que uma disbiose ou a mera presença de bactérias patogênicas pode desencadear uma resposta imune exacerbada promovendo o desenvolvimento de diversas doenças autoimunes como a doença inflamatória intestinal (DII), manifestação intimamente relacionados à SpA4,5. Numerosos estudos visaram descrever a composição da microbiota intestinal e seu papel no desenvolvimento e progressão da SpA6,7, porém a implicação da disbiose observada no intestino desses pacientes não é bem compreendida8. Apesar da controvérsia, a microbiota intestinal parece ser essencial para o desenvolvimento dessas patologias.

O microbioma intestinal possui uma composição extremamente variada com uma diversidade bacteriana variando de 500 a 1000 espécies9. A implementação de tecnologias de sequenciamento maciço baseadas em PCR (ou seja, sequenciamento do gene 16S rRNA) permitiu uma compreensão mais ampla das comunidades microbianas e contribuiu para a descrição do microbioma "saudável" ou "não saudável". Para estudar a composição microbiana do intestino, é possível usar diferentes tipos de amostras, como fezes ou biópsias do trato gastrointestinal (GI). O mais utilizado são as fezes devido à facilidade e ausência de riscos na coleta10, porém a composição do microbioma varia de acordo com a localização no trato gastrointestinal.

Biópsias, microdissecção por captura a laser, escova luminal, entre outras, são alternativas para o estudo regional do trato gastrointestinal que oferecem a descrição mais precisa da microbiota10. No entanto, ainda que seja necessário um procedimento invasivo (por exemplo, colonoscopia), uma biópsia (ou microdissecção por captura a laser) só é solicitada no caso de evidência tecidual anormal, o que dificulta a realização de um número adequado de amostras no contexto de estudos SpA. Além disso, as colonoscopias são prescritas apenas para indivíduos não saudáveis ​​e, considerando os riscos e a complexidade dos procedimentos de colonoscopia, inscrever controles saudáveis ​​sempre atrapalha o desenvolvimento de estudos clínicos. Todas essas razões levaram os estudos da microbiota intestinal ao uso das fezes como um representante da composição do microbioma intestinal, principalmente como uma representação da porção distal do trato GI11. Poucos estudos incluem locais mais proximais como o intestino delgado devido à dificuldade de acesso a essa porção, apesar de ser um dos trajetos mais comprometidos no contexto da EpA12.

 0.2% with a p-value < 0.05, were assumed as significant./p> 0.5%) was bigger, including 22 genera, vs. 16 and 17 for colon and ileum, respectively. At the family level, Ruminococcaceae, Bacteroidaceae, Lachnospiraceae, Enterobacteriaceae, Prevotellaceae, Fusobacteriaceae, Erysipelotrichaceae were present in the lower GI tract predominant bacteriome. At this taxonomic level, feces samples showed in their predominant bacteriome: Succinivibrionaceae, Verrucomicrobiaceae and Bifidobacteriaceae, among others, that are probably being transported from locations distant from the lower GI tract, or different from the mucosa (luminal circulating bacteria), due to these were not detected as predominant in CAL from colon or ileum (Fig. 2B). Order classification showed Clostridiales, Bacteroidales, Enterobacteriales, Fusobacteriales, Erysipelotrichales as predominant in the distant GI tract (Fig. 2C). In general, the bigger diversity and richness observed in feces samples can be explained by an increase in families and genera taxa, but not in order and class where the number of taxa identified as predominant in the three groups was similar (Fig. 2C,D)./p> 0.2% and p-value < 0.05 for at least one paired comparison (ileum or colon vs. feces), were included in the plots. (A) Species classification. (B) Genus. (C) Family. (D) Order, class and phylum./p>

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